尼康显微镜光学切片与德Sénarmont DIC显微镜

2016-05-12技术资料

图像在去Sénarmont DIC显微镜的样品与大型聚光镜和物镜的数值孔径能够从聚焦图像平面上创造显着浅浅的光学部分。无光晕和明亮区域的横向面分心强度波动的干扰移除焦点,该技术得到了巧妙地从复杂的三维相位标本切片清晰的图像。此属性通常用于获得蜂窝轮廓脆光学切片与来自结构的上方和下方的聚焦平面的干扰Zui小复合组织。

教程初始化与随机选择的图像中出现的DIC标本图像窗口和物镜和标本在窗口的右手侧的模型。为了操作的教程,使用物镜焦点滑块通过一系列起始于上表面,并通过中央区域进展到下表面的平面的聚焦样品。当滑块被翻译,在检体的各种图像平面将被带进锐聚焦。同时,显微镜物镜模型将向上和向下移动相对于所述试样,以模拟在显微镜的实际关系。新的标本可以通过从调色板中选择检查选择的样本下拉菜单。(奥林巴斯显微镜)

在发射和反射光显微镜的所有传统形式,聚光镜孔径光阑在定义图像对比度和分辨率的主要作用。减小光圈大小增加了现场和整体图像锐度的深度,同时生产对比度更强。然而,如果聚光镜隔膜被关闭太多,衍射工件变得显而易见并且被牺牲分辨率。通常情况下,Zui佳的光圈设置是准确地之间呈现标本细节在足够的对比度和保留必要的图像分钟功能的分辨率,同时避免衍射文物的妥协。

当聚光镜可变光阑调节至约70%的物镜后孔的尺寸,Zui高性能德SénarmontDIC光学系统产生极好的对比度。然而,这些显微镜也执行高档时聚光镜隔膜打开以物镜后方开口直径相匹配。为了实现对光学切片实验的分辨率和对比度之间的Zui佳平衡,这是至关重要的,该显微镜进行适当配置为科勒照明,而诺马斯基棱镜组件,分析仪,和德Sénarmont补偿器被精确地对准。

取的活的光学切片团藻使用去SénarmontDIC达到上一个组织培养倒置显微镜偏压相位差菌落被示于图1中的水生微生物组成数百至数千相同的绿藻细胞具有大致相同的直径,但组织成几个形态图案。在菌落的周边,单个细胞被布置在半透明宽间隔层称为粘液,如图1(a)中。更远的质量,菌落形成几个集中的球形群体的生殖细胞,称为gonidia,其母公司殖民地内生产的小女儿的殖民地(图1(b))。作为在显微镜被聚焦于粘液菌落的Zui上层上(图1(c)),结构的细节在各个细胞变得可见,但是许多细胞通过子菌落掩蔽。

薄生物标本(10〜20微米厚)通常以较低的放大倍率产生较差的光学部分,但往往揭示重大内部细节时,用具有大数值孔径(60倍和100倍),高倍率的物镜可视化。较厚的样品可容易地切开低放大倍数,其中像差被Zui小化。收集从较厚生物标本的光学部分,尤其是那些浸在食盐水或缓冲溶液,通常是由折射率不连续性,在玻璃盖和安装介质之间的界面上产生的球面像差的阻碍。这件神器将降低分辨率的光学部分系列更高的穿透深度。